Lazer Taramalı Konfokal Mikroskop

Lazer taramalı konfokal mikroskopları doku preparatlarında floresan boyalarla etiketlenmiş hücre içi yapıların veya proteinlerin yerlerini belirleyerek incelemek amacıyla kullanılır. Bunun yanı sıra canlı hücrelerde zamana bağlı moleküllerin hücre içindeki hareketleride izlenebilmektedir. Dokuların ve organellerin dijital ortamda üç boyutlu görüntüleri oluşturulabilmektedir. FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer) uyumlu florasan boyalar kullanılarak protein-protein etkileşimleri incelenebilmektedir. Ayrıca besin maddelerindeki lipid ve proteinlerin görüntülenmesi de LSM tekniğiyle mümkün olabilmektedir.

Konfokal mikroskopinin çalışma prensibi, görüntü düzlemine bir pinhole(aperture) yerleştirilir ve odak dışında kalan ışığın dedektöre ulaşması engellenir. Bu sayede daha keskin görüntüler elde edilmesinin yanı sıra bu örneklerin “z” ekseninde çok daha ince kesitlerden görüntü alınmasını da sağlamaktadır. LSM mikroskopu ile incelenen örneğin farklı derinliklerinden iki boyutlu düzlemsel görüntüler alınır ve bu görüntüler üst üste yığılarak 3 boyutlu görüntüler oluşturulur.

• LSM 710’da 6 adet lazer çeşidi mevcuttur;
  • 405 Nm Diode Laser (DAPI, ALexa 350).
  • 458 Nm, 488 Nm, 514 Nm Multiline Argon Laser.
  • 561 Nm Diode Pumped Solid State Laser.
  • 633 Nm HeNe Laser.
• Mikroskopta 4 farklı filtre bulunmaktadır (DAPI, GFP, DsRED Ve Rhodamine).
• Aydınlık alan görüntüsüde (BF) alınabilmektedir.
• 5 farklı objektif içermektedir (10x, 20x, 25x, 40x, 63x).
• Dijital mikroskop kamera sistemine sahiptir (AxioCam).
• 4×1, 6144×6144 piksel görüntü çözünürlük kalitesine sahiptir.
• Düşük gürültü için piksel başına %30 oranında daha uzun süre ile yüksek hızda örneklenme sağlar.
• Tam dalga boyu aralığında 34 kanala kadar paralel görüntüleme sağlar.
• Karbondioksit ve sıcaklık kontrollü inkübasyon ünitesi sayesinde hücre kültürü çalışmalarına da cevap verecek şekilde dizayn edilmiştir.
• 400-700 nm arasında tarama yapılmasına olanak sağlar (1 nm aralıklarda).
• 2D, 2.5 D ve beraberinde 3D görüntü alınmasına olanak sağlar
• Örneklerden istenilen zaman, lokasyon ve istenilen sayıda görüntü alınmasını sağlar.
• Örneklerden tam alan görüntüsü alınmasına olanak sağlar.
• Soldurma deneylerinin gerçekleştirilmesine olanak sağlar.

• Hazır Preparat Görüntüleme (Araştırmacı tarafından örnek hazır getirilir, kullanılan floresan işaretin eksitasyon ve emisyon dalga boyları araştırmacı tarafından belirtilmelidir.)
• Hazır Preparatlar için Görüntüleme denemesi (Araştırmacı tarafından örnek hazır getirilir, kullanılan floresan işaretin eksitasyon ve emisyon dalga boyları araştırmacı tarafından belirtilmelidir.)
• Hazır Preparat Görüntüleme: 2D görüntüleme
• Hazır Preparat Görüntüleme: 3D (Z-stack) görüntüleme
• Hazır Preparat Görüntüleme: Tile scan (tam görüntü alma)
• Hazır Preparat Görüntüleme: Time series (istenilen zaman ve lokasyondan isteilen sayıda görüntü alınarak video haline getirilme)
• Hazır Preparat Görüntüleme: Fotobleaching (soldurma deneyleri)